Msds Approved Enzyme Immunoassay Kit, Kidney Injury Molecule 1 Zestaw do testu Elisa

96-studzienkowy ludzki preparat ELISA o wysokiej specyficzności molekularnej z uszkodzeniem nerek

Cat.No E 1099Hu

Sayay P rinciple
Ten zestaw jest enzymatycznym testem immunosorbentnym (ELISA). Płytka została wstępnie pokryta ludzkim przeciwciałem Kim-1. Obecny w próbce Kim-1 jest dodawany i wiąże się z przeciwciałami pokrytymi na studzienkach. Następnie dodaje się biotynylowane ludzkie przeciwciało Kim-1 i wiąże się z Kim-1 w próbce. Następnie dodaje się streptawidynę-HRP i wiąże się z biotynylowanym przeciwciałem Kim-1. Po inkubacji niezwiązana Streptawidyna-HRP jest wymywana podczas etapu mycia. Następnie dodaje się roztwór substratu i kolor rozwija się proporcjonalnie do ilości ludzkiego Kim-1. Reakcję kończy się przez dodanie kwasowego roztworu zatrzymującego i mierzy absorbancję przy 450 nm.

R eagent P rovided

M aterial R equired B ut N ot Dostarczane

• Inkubator o temperaturze 37 ° C ± 0,5 ° C
• Papier chłonny
• Precyzyjne pipety i jednorazowe końcówki do pipet
• Wyczyść rury
• Woda dejonizowana lub destylowana
• Czytnik mikropłytek z filtrem długości fali 450 ± 10 nm

Kolekcja próbek
Surowica Pozwól skrzepnąć surowicy przez 10-20 minut w temperaturze pokojowej. Wiruj przy 2000-3000 RPM przez 20 minut.

Osocze Zbierz osocze za pomocą EDTA lub heparyny jako antykoagulantu. Wirować próbki przez 15 minut przy 2000-3000 RPM w temperaturze 2 - 8 ° C w ciągu 30 minut od pobrania.

Mocz Odbierz przez sterylną rurkę. Wiruj przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut. Podczas pobierania płynu opłucnowego i płynu mózgowo-rdzeniowego postępuj zgodnie z wyżej wymienionymi procedurami.

Komercyjn e proberat ciał komórek Zebrać za pomocą sterylnych probówek podczas badania wydzielonych składników. Wiruj przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut. Zebrać ostrożnie supernatanty. Podczas badania składników w komórce, użyj PBS (pH 7,2-7,4), aby rozcieńczyć zawiesinę komórek do stężenia komórek około 1 milion / ml. Uszkadzaj komórki poprzez powtarzane cykle zamrażania i rozmrażania, aby wypuścić składniki wewnętrzne. Wiruj przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut.

Tkanki Przepłukać tkanki w PBS (pH 7,4), aby dokładnie usunąć nadmiar krwi i zważyć przed homogenizacją. Zmiel tkanki i homogenizuj je w PBS (pH 7,4) za pomocą szklanego homogenizatora na lodzie. Rozmrozić w temperaturze 2-8 ° C lub zamrozić w temperaturze -20 ° C. Wiruj przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut.

Uwaga

• Stężenia próbek należy przewidzieć przed użyciem w teście. Jeśli stężenie próbki nie mieści się w zakresie krzywej standardowej, użytkownicy muszą skontaktować się z nami, aby określić optymalną próbkę do poszczególnych eksperymentów.
• Próbki do użycia w ciągu 5 dni należy przechowywać w temperaturze 2-8 ° C. Próbki należy podzielić na porcje lub przechowywać w temperaturze -20 ° C w ciągu 1 miesiąca lub w temperaturze -80 ° C w ciągu 6 miesięcy. Unikaj powtarzających się cykli rozmrażania.
• Przed rozpoczęciem testu próbki należy doprowadzić do temperatury pokojowej.
• Wirować, aby zebrać próbkę przed użyciem.
• Próbki zawierające NaN3 nie mogą być testowane, ponieważ hamują aktywność peroksydazy chrzanowej (HRP).
• Zebrać ostrożnie supernatanty. Gdy osady wystąpiły podczas przechowywania, wirowanie powinno być przeprowadzone ponownie.
• Hemoliza może znacząco wpłynąć na ważność wyników badań. Uważaj, aby zminimalizować hemolizę.

* Tego zestawu nie można rozcieńczyć . Dzięki materiałowi, którego używamy do przygotowania zestawu, interferencja matrycy próbki może fałszywie obniżyć specyficzność i dokładność testu.

Umary
1. Przygotuj wszystkie odczynniki, próbki i standardy.
2. Dodaj próbkę i odczynnik ELISA do każdego dołka. Inkubować przez 1 godzinę w 37 ° C.
3. Umyj płytkę 5 razy.
4. Dodać roztwór substratu A i B. Inkubować przez 10 minut w 37 ° C.
5. Dodaj roztwór zatrzymujący i powstanie kolor.
6. Odczytaj wartość OD w ciągu 10 minut.

Zakres krzywej standardowej : 0,05 ng / ml - 10 ng / ml
Czułość : 0,024 ng / ml
Rozmiar : 96 dołków
* Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do celów badawczych, nie do użytku w procedurach diagnostycznych. Zaleca się przeczytanie tej instrukcji przed użyciem.

„Immunoglobulina A (IgA) jest naturalnym ligandem receptora komórkowego wirusa zapalenia wątroby typu A 1 (HAVCR1), a związek IgA z HAVCR1 zwiększa interakcje wirus-receptor.