Niestandardowy zestaw ślinowaty ELISA typu Sandwich Klaster Różnicowania 14

Zestaw testowy Sandwich typu Śledź klastra z różnicowania 14 Zestaw testów immunologicznych Sandwich Dostosowany

Nr kat. E 0039Po

Ntend U se

Ten zestaw kanapkowy służy do dokładnego wykrywania ilościowego świńskiego klastra różnicowania (znanego również jako CD14) w surowicy, osoczu, nadsączach hodowli komórkowych, lizatach komórkowych, homogenatach tkankowych.

* Ten produkt służy wyłącznie do celów badawczych, a nie do użytku w procedurach diagnostycznych. Przed użyciem zaleca się przeczytanie tej instrukcji .

Standardowy zakres krzywej : 0,05 mg / L - 10 mg / L

Czułość : 0,022 mg / L

Rozmiar : 96 dołków

P przestrogi

• Przed użyciem zestaw testowy ELISA i próbkę należy ogrzać w sposób naturalny do temperatury pokojowej 30 minut.
• Ta instrukcja musi być ściśle przestrzegana w eksperymencie.
• Po usunięciu pożądanej liczby pasków, natychmiast ponownie zamknij torebkę, aby zabezpieczyć pozostałą część przed zniszczeniem. Zakryj wszystkie odczynniki, gdy nie są używane.
• Upewnić się, że kolejność pipetowania i szybkość dodawania od dołków podczas odmierzania odczynników są dokładne.
• Końcówki pipety i uszczelniacz do płytek w ręce powinny być czyste i jednorazowe, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego.
• Unikaj używania odczynników z różnych partii razem.
• Roztwór substratu B jest wrażliwy na światło, nie wystawiając roztworu B na światło przez długi czas.
• Roztwór zatrzymujący zawiera kwas. Podczas korzystania z tego materiału należy nosić okulary ochronne na oczy, dłonie i skórę. Unikać kontaktu skóry lub błon śluzowych z odczynnikiem zestawu.
• Zestawu testowego ELISA nie należy używać po upływie terminu ważności.

Z ast ę z ą d ze ś ciowe

P ragacja naprawcza

Przed użyciem wszystkie odczynniki należy doprowadzić do temperatury pokojowej.

Standard Odtworzyć 120 μl wzorca (12,8 mg / L) z 120 μl standardowego rozcieńczalnika w celu wytworzenia standardowego roztworu podstawowego o stężeniu 6,4 mg / L. Odstawić standard na 15 minut z delikatnym mieszaniem przed rozcieńczeniem. Przygotuj podwójne punkty standardowe, seryjnie rozcieńczając standardowy roztwór podstawowy (6,4 mg / L) 1: 2 standardowym rozcieńczalnikiem, aby uzyskać roztwory o stężeniu 3,2 mg / L, 1,6 mg / L, 0,8 mg / L i 0,4 mg / L. Standardowy rozcieńczalnik służy jako standard zerowy (0 mg / L). Pozostały roztwór należy zamrozić w temperaturze -20 ° C i zużyć w ciągu jednego miesiąca. Proponowane rozcieńczenia roztworów standardowych są następujące:

Bufor do przemywania Rozcieńczyć 20 ml koncentratu buforu płuczącego 30x do wody dejonizowanej lub destylowanej, aby uzyskać 500 ml 1x buforu do przemywania. Jeśli w koncentracie utworzyły się kryształy, delikatnie mieszaj, aż kryształy całkowicie się rozpuści.

P Rocedura

1. Przygotuj wszystkie odczynniki, roztwory standardowe i próbki zgodnie z instrukcją. Przed użyciem wszystkie odczynniki należy doprowadzić do temperatury pokojowej. Test przeprowadza się w temperaturze pokojowej.

2. Określ liczbę pasków wymaganych do testu. Wstaw paski w ramkach do użycia. Niewykorzystane paski należy przechowywać w temperaturze 2-8 ° C.

3. Dodaj standard 50 μl do standardowej studzienki. Uwaga : Nie dodawaj przeciwciał do standardowej studzienki, ponieważ standardowy roztwór zawiera biotynylowane przeciwciało.

4. Dodaj 40 μl próbki do dołków do próbek, a następnie dodaj 10 μl przeciwciała anty-CD14 do dołków do próbek, a następnie dodaj 50 μl streptawidyny-HRP do dołków do próbek i standardowych dołków (niezawierająca ślepej próby kontrolnej). Dobrze wymieszaj. Przykryj płytę uszczelniaczem. Inkubować 60 minut w 37 ° C.

5. Usuń uszczelniacz i przemyj płytkę 5 razy buforem do przemywania. Namoczyć studzienki za pomocą co najmniej 0,35 ml buforu do płukania przez 30 sekund do 1 minuty na każde płukanie. W celu zautomatyzowanego mycia odessać wszystkie studzienki i przemyć 5-krotnie buforem do przemywania, przepełniając dołki buforem do przemywania. Wymieszać płytkę na ręcznikach papierowych lub innym chłonnym materiale.

6. Dodaj 50 μl roztworu substratu A do każdej studzienki, a następnie dodaj 50 μl roztworu substratu B do każdej studzienki. Inkubować płytkę pokrytą nowym uszczelniaczem przez 10 minut w temperaturze 37 ° C w ciemności.

7. Dodaj 50 μl roztworu zatrzymującego do każdej studzienki, niebieski kolor natychmiast zmieni kolor na żółty.

8. Określ gęstość optyczną (wartość OD) każdej studzienki natychmiast, używając czytnika mikropłytek ustawionego na 450 nm w ciągu 10 minut po dodaniu roztworu zatrzymującego.