Szczegóły Produktu:
Zapłata:
|
Uniprot No.: | M5DFN4 | Zwyczaj: | Dostępne |
---|---|---|---|
marki: | BT Lab | Metoda badania: | Kanapka |
Długość testu: | W ciągu 48 godzin | Pamięci masowej: | 2-8° C |
High Light: | protein elisa kit,elisa test kit |
Zestaw testowy Syndecan-1 ELISA na bazie szynki, dostosowany do potrzeb pacjenta, z 2-godzinnym czasem testu
Nr katalogowy E0 604 Po
Zamierzony U se
Ten zestaw kanapkowy służy do dokładnego wykrywania ilościowego Syndekanu-1 świni (znanego również jako SDC1) w surowicy, osoczu, supernatantach hodowli komórkowych, lizatach komórkowych, homogenatach tkankowych.
Standardowy zakres krzywej : 2ng / ml - 600ng / ml
Czułość : 1,26ng / ml
Rozmiar : 96 dołków
* Ten produkt służy wyłącznie do celów badawczych, a nie do użytku w procedurach diagnostycznych. Przed użyciem zaleca się przeczytanie tej instrukcji.
Zasada testu
Ten zestaw testowy ELISA jest testem immunoenzymatycznym (ELISA). Płytkę wstępnie powleczono przeciwciałem świńskim SDC1. SDC1 obecny w próbce jest dodawany i wiąże się z przeciwciałami pokrytymi w studzienkach. Następnie dodaje się biotynylowane przeciwciało świńskie SDC1 i wiąże się z SDC1 w próbce. Następnie dodaje się streptawidynę-HRP i wiąże się z biotynylowanym przeciwciałem SDC1. Po inkubacji niezwiązana Streptawidyna-HRP jest wymywana podczas etapu przemywania. Następnie dodaje się roztwór substratu i kolor rozwija się proporcjonalnie do ilości świńskich SDC1. Reakcję zakończono przez dodanie kwaśnego roztworu zatrzymującego i zmierzono absorbancję przy 450 nm.
Z ast ę z ą d ze ś ciowe
składniki | Ilość |
Roztwór standardowy (640ng / ml) | 0,5 ml x 1 |
Wstępnie powlekana płytka ELISA | 12 * 8 dołków pasków x1 |
Rozcieńczalnik standardowy | 3 ml x1 |
Streptawidyna-HRP | 6 ml x1 |
Zatrzymaj rozwiązanie | 6 ml x1 |
Roztwór substratu A | 6 ml x1 |
Roztwór substratu B | 6 ml x1 |
Koncentrat buforu przemywania (30x) | 20 ml x 1 |
Biotynylowane świńsko ASDC1 Przeciwciało | 1 ml x1 |
Instrukcja użytkownika | 1 |
Uszczelniacz płyt | 2 zdjęcia |
Torba na zamek błyskawiczny | 1 zdjęcie |
Kolekcja próbek
Surowica Pozwól surowicy skrzepnąć przez 10-20 minut w temperaturze pokojowej. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez 20 minut.
Osocze Zdobywaj osocze, używając EDTA lub heparyny jako antykoagulantu. Wirować próbki przez 15 minut przy 2000-3000 obrotów na minutę w temperaturze 2 - 8 ° C w ciągu 30 minut od pobrania.
Mocz Zebrać za pomocą sterylnej rurki. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut. Podczas gromadzenia płynu ustno-otrzewnowego i płynu mózgowo-rdzeniowego należy postępować zgodnie z wyżej wymienionymi procedurami.
Komórka C u poz ąnn ę su-pochłaniacza Zebrać za pomocą sterylnych probówek podczas badania wydzielanych składników. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut. Zbierz ostrożnie supernatanty. Podczas badania składników w komórce należy użyć PBS (pH 7,2-7,4), aby rozcieńczyć zawiesinę komórek do stężenia komórek około 1 miliona / ml. Uszkadzaj komórki przez powtarzające się cykle zamrażania i rozmrażania, aby wypuścić składniki wewnętrzne. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut.
Tkanki Wypłukać tkanki w PBS (pH 7,4) w celu dokładnego usunięcia nadmiaru krwi i zważyć przed homogenizacją. Mielimy tkanki i homogenizujemy je w PBS (pH 7,4) za pomocą szklanego homogenizatora na lodzie. Rozmrozić w 2-8 ° C lub zamrozić w temperaturze -20 ° C. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut.
Uwaga
* Nie można rozcieńczać tego zestawu. Ze względu na materiał, którego używamy do przygotowania zestawu, zakłócenie matrycy próbki może fałszywie obniżyć swoistość i dokładność testu.
P Rocedura
1. Przygotuj wszystkie odczynniki, roztwory standardowe i próbki zgodnie z instrukcją. Przed użyciem wszystkie odczynniki należy doprowadzić do temperatury pokojowej. Test przeprowadza się w temperaturze pokojowej.
2. Określ liczbę pasków wymaganych do testu. Wstaw paski w ramkach do użycia. Niewykorzystane paski należy przechowywać w temperaturze 2-8 ° C.
3. Dodaj standard 50 μl do standardowej studzienki. Uwaga : Nie dodawaj przeciwciał do standardowej studzienki, ponieważ standardowy roztwór zawiera biotynylowane przeciwciało.
4. Dodaj 40 μl próbki do dołków do próbek, a następnie dodaj 10 μl przeciwciała anty-SDC1 do dołków do próbek, następnie dodaj 50 μl streptawidyny-HRP do dołków do próbek i standardowych dołków (niezawierająca pustej studzienki kontrolnej). Dobrze wymieszaj. Przykryj płytę uszczelniaczem. Inkubować 60 minut w 37 ° C.
5. Usuń uszczelniacz i przemyj płytkę 5 razy buforem do przemywania. Namoczyć studzienki za pomocą co najmniej 0,35 ml buforu do płukania przez 30 sekund do 1 minuty na każde płukanie. W celu zautomatyzowanego mycia odessać wszystkie studzienki i przemyć 5-krotnie buforem do przemywania, przepełniając dołki buforem do przemywania. Wymieszać płytkę na ręcznikach papierowych lub innym chłonnym materiale.
6. Dodaj 50 μl roztworu substratu A do każdej studzienki, a następnie dodaj 50 μl roztworu substratu B do każdej studzienki. Inkubować płytkę pokrytą nowym uszczelniaczem przez 10 minut w temperaturze 37 ° C w ciemności.
7. Dodaj 50 μl roztworu zatrzymującego do każdej studzienki, niebieski kolor natychmiast zmieni kolor na żółty.
8. Określ gęstość optyczną (wartość OD) każdej studzienki natychmiast, używając czytnika mikropłytek ustawionego na 450 nm w ciągu 10 minut po dodaniu roztworu zatrzymującego.
S ummary
1. Przygotuj wszystkie odczynniki, próbki i standardy.
2. Do każdej studzienki dodaj próbkę i odczynnik ELISA. Inkubować przez 1 godzinę w 37 ° C.
3. Umyj płytkę 5 razy.
4. Dodaj roztwór substratu A i B. Inkubuj przez 10 minut w 37 ° C.
5. Dodaj roztwór zatrzymujący i kolor się rozwija.
6. Odczytaj wartość OD w ciągu 10 minut.
Osoba kontaktowa: Lee
1.52ng / L Czułość Human TNF Alpha ELISA Kit / Zestaw ELISA z martwicą guzów Alpha
Zestaw 48 ELISA Wells / 96 Wells Human ELISA, zestaw Sandwich Human Leptin ELISA
Zestaw do testu ELISA High Precision Human, zestaw do oznaczania ludzkiej insuliny 96 Wells
Zestaw ELISA szczurowej katalizy o wysokiej specyficzności do dokładnego wykrywania ilościowego
0.052ng / L Czułość Zestaw testu ELISA Interleukin 6 / IL6 Rat CE / ISO / MSDS Standard
Poliklonalne źródło królika PDK1 Przeciwciało w -20 ° C Temperatura przechowywania
Powinowactwo - oczyszczone przeciwciało ICAM1 z Rabbit Antiserum Byaffinity - Chromatography
Wysokoczułe królicze anty-DTL przeciwciała poliklonalne o stężeniu 1 mg / ml