SDC1 Test immunoenzymatyczny świński ELISA Zestaw 96 dołków o dużej gęstości

Zestaw testowy do testu immunologicznego Sandwich na krew SDC1 Rozmiar 96 studzienek z dużą czułością i specyficznością

Nr katalogowy E0 604 Po
Ntend U se
Ten zestaw kanapkowy służy do dokładnego wykrywania ilościowego Syndekanu-1 świni (znanego również jako SDC1) w surowicy, osoczu, supernatantach hodowli komórkowych, lizatach komórkowych, homogenatach tkankowych.

Zasada testu
Ten zestaw testowy ELISA jest testem immunoenzymatycznym (ELISA). Płytkę wstępnie powleczono przeciwciałem świńskim SDC1. SDC1 obecny w próbce jest dodawany i wiąże się z przeciwciałami pokrytymi w studzienkach. Następnie dodaje się biotynylowane przeciwciało świńskie SDC1 i wiąże się z SDC1 w próbce. Następnie dodaje się streptawidynę-HRP i wiąże się z biotynylowanym przeciwciałem SDC1. Po inkubacji niezwiązana Streptawidyna-HRP jest wymywana podczas etapu przemywania. Następnie dodaje się roztwór substratu i kolor rozwija się proporcjonalnie do ilości świńskich SDC1. Reakcję zakończono przez dodanie kwaśnego roztworu zatrzymującego i zmierzono absorbancję przy 450 nm.
* Ten produkt służy wyłącznie do celów badawczych, a nie do użytku w procedurach diagnostycznych. Przed użyciem zaleca się przeczytanie tej instrukcji.

P przestrogi

• Przed użyciem zestaw testowy ELISA i próbkę należy ogrzać w sposób naturalny do temperatury pokojowej 30 minut.
• Ta instrukcja musi być ściśle przestrzegana w eksperymencie.
• Po usunięciu pożądanej liczby pasków, natychmiast ponownie zamknij torebkę, aby zabezpieczyć pozostałą część przed zniszczeniem. Zakryj wszystkie odczynniki, gdy nie są używane.
• Upewnić się, że kolejność pipetowania i szybkość dodawania od dołków podczas odmierzania odczynników są dokładne.
• Końcówki pipety i uszczelniacz do płytek w ręce powinny być czyste i jednorazowe, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego.
• Unikaj używania odczynników z różnych partii razem.
• Roztwór substratu B jest wrażliwy na światło, nie wystawiając roztworu B na światło przez długi czas.
• Roztwór zatrzymujący zawiera kwas. Podczas korzystania z tego materiału należy nosić okulary ochronne na oczy, dłonie i skórę. Unikać kontaktu skóry lub błon śluzowych z odczynnikiem zestawu.
• Zestawu nie należy używać po upływie terminu ważności.

Z ast ę z ą d ze ś ciowe

P ragacja naprawcza
Przed użyciem wszystkie odczynniki należy doprowadzić do temperatury pokojowej.
Standard Rozpuść 120 μl wzorca (640 ng / ml) za pomocą 120 μl standardowego rozcieńczalnika w celu wytworzenia standardowego roztworu podstawowego o stężeniu 320 ng / ml. Odstawić standard na 15 minut z delikatnym mieszaniem przed rozcieńczeniem. Przygotuj podwójne punkty standardowe, seryjnie rozcieńczając standardowy roztwór podstawowy (320ng / ml) 1: 2 standardowym rozcieńczalnikiem, aby uzyskać roztwory o stężeniu 160 ng / ml, 80 ng / ml, 40 ng / ml i 20 ng / ml. Standardowy rozcieńczalnik służy jako zerowy wzorzec (0 ng / ml). Pozostały roztwór należy zamrozić w temperaturze -20 ° C i zużyć w ciągu jednego miesiąca. Proponowane rozcieńczenia roztworów standardowych są następujące:

Bufor do przemywania Rozcieńczyć 20 ml koncentratu buforu płuczącego 30x do wody dejonizowanej lub destylowanej, aby uzyskać 600 ml 1x buforu do przemywania. Jeśli w koncentracie utworzyły się kryształy, delikatnie mieszaj, aż kryształy całkowicie się rozpuści.

S ummary
1. Przygotuj wszystkie odczynniki, próbki i standardy.
2. Do każdej studzienki dodaj próbkę i odczynnik ELISA. Inkubować przez 1 godzinę w 37 ° C.
3. Umyj płytkę 5 razy.
4. Dodaj roztwór substratu A i B. Inkubuj przez 10 minut w 37 ° C.
5. Dodaj roztwór zatrzymujący i kolor się rozwija.
6. Odczytaj wartość OD w ciągu 10 minut.

C alokacja wyniku
Zbuduj krzywą standardową, wykreślając średnią OD dla każdego standardu na osi pionowej (Y) względem stężenia na osi poziomej (X) i narysuj krzywą najlepszego dopasowania przez punkty na wykresie. Te obliczenia można najlepiej wykonać za pomocą komputerowego oprogramowania dopasowującego krzywa, a linię najlepszego dopasowania można określić za pomocą analizy regresji.