Zestaw testowy ELISA o 96 dołkach Kinaza kreatynowa Izoenzym MM o specyficzności 1,62 μU / ml

Indywidualny zestaw do analizy szczurzego kinazy kreatynowej MM izoenzym ELISA Rozmiar 96 dołków o silnej specyficzności

Nr kat. E1930Ra

Standardowy zakres krzywej : 3 μU / ml - 900 μU / ml

Czułość : 1,62 μU / ml

Rozmiar : 96 studzienek

Przechowywanie : Przechowuj odczynniki w temperaturze 2–8 ° C. W przypadku przechowywania przez ponad 6 miesięcy należy zapoznać się z datą ważności przechowywać w temperaturze -20 ° C. Unikaj powtarzających się cykli rozmrażania. W przypadku otwarcia poszczególnych odczynników zaleca się użycie zestawu w ciągu 1 miesiąca.

* Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do celów badawczych, a nie do użytku w procedurach diagnostycznych. Zdecydowanie zaleca się przeczytanie tej instrukcji całkowicie przed użyciem.

Przygotowanie odczynnika

Wszystkie odczynniki należy przed użyciem doprowadzić do temperatury pokojowej.

Standard Odtworzyć 120 μl wzorca (960 μU / ml) ze 120 μl standardowego rozcieńczalnika, aby uzyskać standardowy roztwór podstawowy 480 μU / ml. Pozwól standardowi siedzieć przez 15 minut z delikatnym mieszaniem przed wykonaniem rozcieńczeń. Przygotuj zduplikowane punkty standardowe, seryjnie rozcieńczając standardowy roztwór podstawowy (480 μU / ml) 1: 2 standardowym rozcieńczalnikiem, aby uzyskać roztwory 240 μU / ml, 120 μU / ml, 60 μU / ml i 30 μU / ml. Standardowy rozcieńczalnik służy jako wzorzec zerowy (0 μU / ml). Wszelkie pozostałe roztwory należy zamrozić w temperaturze -20 ° C i zużyć w ciągu jednego miesiąca. Proponowane rozcieńczenie standardowych roztworów jest następujące:

Bufor płuczący Rozcieńczyć 20 ml koncentratu buforu płuczącego 25x do dejonizowanej lub destylowanej wody, aby uzyskać 500 ml 1x buforu płuczącego. Jeśli w koncentracie utworzyły się kryształy, delikatnie mieszaj, aż kryształy całkowicie się rozpuszczą.

Precyzja

Precyzja wewnątrz testu (Precyzja w teście) Trzy próbki o znanym stężeniu testowano na jednej płytce w celu oceny precyzji w teście.

Precyzja między testami (Precyzja między testami) Trzy próbki o znanym stężeniu badano w oddzielnych testach w celu oceny precyzji między testami.

CV (%) = SD / średnia x 100

Test wewnętrzny: CV <8%

Inter-Assay: CV <10%

Przeznaczenie

Ten zestaw warstwowy służy do dokładnego wykrywania ilościowego izoenzymu MM kinazy kreatynowej szczura (znanego również jako CK-MM) w surowicy, osoczu, supernatantach hodowli komórkowej, lizatach komórkowych, homogenatach tkankowych.

Środki ostrożności

• Przed użyciem zestaw testowy Elisa i próbkę należy naturalnie ogrzać do temperatury pokojowej przez 30 minut.
• W eksperymencie należy ściśle przestrzegać tej instrukcji.
• Po usunięciu żądanej liczby pasków natychmiast ponownie zamknij torebkę, aby zabezpieczyć resztki przed zniszczeniem. Zakryj wszystkie odczynniki, gdy nie są używane.
• Upewnij się, że kolejność pipetowania i szybkość dodawania od studni do studni podczas pipetowania odczynników.
• Końcówki do pipet i uszczelniacz do płyt w dłoni powinny być czyste i jednorazowe, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego.
• Unikaj jednoczesnego używania odczynników z różnych partii.
• Roztwór substratu B jest wrażliwy na światło, nie wystawiaj roztworu substratu B na działanie światła przez długi czas.
• Roztwór zatrzymujący zawiera kwas. Podczas korzystania z tego materiału należy nosić ochronę oczu, dłoni i skóry. Unikać kontaktu skóry lub błon śluzowych z odczynnikiem zestawu.
• Zestawu testowego Elisa nie należy używać po upływie daty ważności.

Podsumowanie

1. Przygotuj wszystkie odczynniki, próbki i standardy.

2. Dodaj próbkę i odczynnik ELISA do każdego dołka. Inkubować przez 1 godzinę w 37 ° C.

3. Umyj płytkę 5 razy.

4. Dodaj roztwór substratu A i B. Inkubuj przez 10 minut w 37 ° C.

5. Dodaj roztwór zatrzymujący i kolor się rozwija.

6. Odczytaj wartość OD w ciągu 10 minut.

Obliczanie wyniku

Skonstruuj krzywą standardową, wykreślając średnią gęstość optyczną dla każdego standardu na osi pionowej (Y) względem stężenia na osi poziomej (X) i narysuj krzywą najlepszego dopasowania przez punkty na wykresie. Obliczenia te można najlepiej wykonać za pomocą komputerowego oprogramowania do dopasowywania krzywych, a najlepszą linię dopasowania można określić na podstawie analizy regresji.