Zestaw do testu ludzkiej immunosorbentu do kanapek 96 studzienek AGBL3 o wysokiej swoistości

Zestaw do testu immunosorbentu z ludzką kanapką 96-studzienkowy zestaw testowy AGBL3 ELISA o wysokiej swoistości

Nr kat. E 4 526Hu

Podsumowanie

1. Przygotuj wszystkie odczynniki, próbki i standardy.

2. Dodaj próbkę i odczynnik ELISA do każdego dołka. Inkubować przez 1 godzinę w 37 ° C.

3. Umyj płytkę 5 razy.

4. Dodaj roztwór substratu A i B. Inkubuj przez 10 minut w 37 ° C.

5. Dodaj roztwór zatrzymujący i kolor się rozwija.

6. Odczytaj wartość OD w ciągu 10 minut.

Obliczanie wyniku

Skonstruuj krzywą standardową, wykreślając średnią gęstość optyczną dla każdego standardu na osi pionowej (Y) względem stężenia na osi poziomej (X) i narysuj krzywą najlepszego dopasowania przez punkty na wykresie. Obliczenia te można najlepiej wykonać za pomocą komputerowego oprogramowania do dopasowywania krzywych, a najlepszą linię dopasowania można określić na podstawie analizy regresji.

Precyzja

Precyzja wewnątrz testu (Precyzja w teście) Trzy próbki o znanym stężeniu testowano na jednej płytce w celu oceny precyzji w teście.

Precyzja między testami (Precyzja między testami) Trzy próbki o znanym stężeniu badano w oddzielnych testach w celu oceny precyzji między testami.

CV (%) = SD / średnia x 100

Test wewnętrzny: CV <8%

Inter-Assay: CV <10%

Przeznaczenie

Ten zestaw kanapkowy służy do dokładnego ilościowego wykrywania ludzkiej cytozolowej karboksypetydazy 3 (znanej również jako AGBL3) w surowicy, osoczu, supernatantach z hodowli komórkowej, lizatach komórkowych, homogenatach tkankowych.

Zasada testu

Ten zestaw testowy Elisa jest testem immunosorbentowym połączonym z enzymem (ELISA). Płytkę wstępnie powleczono ludzkim przeciwciałem AGBL3. AGBL3 obecny w próbce jest dodawany i wiąże się z przeciwciałami powleczonymi na studzienkach. Następnie dodaje się biotynylowane ludzkie przeciwciało AGBL3 i wiąże się z AGBL3 w próbce. Następnie dodaje się streptawidynę-HRP i wiąże się z biotynylowanym przeciwciałem AGBL3. Po inkubacji niezwiązany streptawidyna-HRP jest wymywana podczas etapu przemywania. Następnie dodaje się roztwór substratu i kolor rozwija się proporcjonalnie do ilości ludzkiego AGBL3. Reakcję kończy się przez dodanie kwasowego roztworu zatrzymującego i mierzy się absorbancję przy 450 nm.

Standardowy zakres krzywej : 0,05 ng / ml - 20 ng / ml

Czułość : 0,019 ng / ml

Rozmiar : 96 studzienek

Przechowywanie : Przechowuj odczynniki w temperaturze 2–8 ° C. W przypadku przechowywania przez ponad 6 miesięcy należy zapoznać się z datą ważności przechowywać w temperaturze -20 ° C. Unikaj powtarzających się cykli rozmrażania. W przypadku otwarcia poszczególnych odczynników zaleca się użycie zestawu w ciągu 1 miesiąca.

* Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do celów badawczych, a nie do użytku w procedurach diagnostycznych. Zdecydowanie zaleca się przeczytanie tej instrukcji całkowicie przed użyciem.

Dostarczony odczynnik

Środki ostrożności

• Przed użyciem zestaw testowy Elisa i próbkę należy naturalnie ogrzać do temperatury pokojowej przez 30 minut.
• W eksperymencie należy ściśle przestrzegać tej instrukcji.
• Po usunięciu żądanej liczby pasków natychmiast ponownie zamknij torebkę, aby zabezpieczyć resztki przed zniszczeniem. Zakryj wszystkie odczynniki, gdy nie są używane.
• Podczas pipetowania odczynników upewnij się, że kolejność pipetowania i szybkość dodawania od studni do studni.
• Końcówki do pipet i uszczelniacz do płyt w dłoni powinny być czyste i jednorazowe, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego.
• Unikaj jednoczesnego używania odczynników z różnych partii.
• Roztwór substratu B jest wrażliwy na światło, nie wystawiaj roztworu substratu B na działanie światła przez długi czas.
• Roztwór zatrzymujący zawiera kwas. Podczas korzystania z tego materiału należy nosić ochronę oczu, dłoni i skóry. Unikać kontaktu skóry lub błon śluzowych z odczynnikiem zestawu.
• Zestawu testowego Elisa nie należy używać po upływie daty ważności.

Przygotowanie odczynnika

Wszystkie odczynniki należy przed użyciem doprowadzić do temperatury pokojowej.

Standard Odtworzyć 120 μl wzorca (24ng / ml) ze 120 μl standardowego rozcieńczalnika, aby uzyskać standardowy roztwór podstawowy 12ng / ml. Pozwól wzorcowi siedzieć przez 15 minut z delikatnym mieszaniem przed sporządzeniem rozcieńczeń. Przygotuj podwójne punkty standardowe, seryjnie rozcieńczając standardowy roztwór podstawowy (12ng / ml) 1: 2 standardowym rozcieńczalnikiem, aby uzyskać roztwory 6ng / ml, 3ng / ml, 1,5ng / ml i 0,75ng / ml. Standardowy rozcieńczalnik służy jako zerowy wzorzec (0 ng / ml). Wszelkie pozostałe roztwory należy zamrozić w temperaturze -20 ° C i zużyć w ciągu jednego miesiąca. Proponowane rozcieńczenie standardowych roztworów jest następujące:

Bufor płuczący Rozcieńczyć 20 ml koncentratu buforu płuczącego 25x do dejonizowanej lub destylowanej wody, aby uzyskać 500 ml 1x buforu płuczącego. Jeśli w koncentracie utworzyły się kryształy, delikatnie mieszaj, aż kryształy całkowicie się rozpuszczą.