Zestaw ELISA GABA-B Gamma Aminobutyric B kwas 96 dołków / 48 dołków 1,05 μG / Dl Czułość

Indywidualny zestaw testowy ELISA ludzkiego GABA-B Wysokoczuły zestaw testu ELISA kwasu gamma-aminomasłowego

Zasada testu

Ten zestaw testowy Elisa jest testem immunosorbentowym połączonym z enzymem (ELISA). Płytkę wstępnie powleczono ludzkim przeciwciałem GABA-B. GABA-B obecny w próbce jest dodawany i wiąże się z przeciwciałami powleczonymi na studzienkach. Następnie dodaje się biotynylowane ludzkie przeciwciało GABA-B i wiąże się z GABA-B w próbce. Następnie dodaje się streptawidynę-HRP i wiąże się z biotynylowanym przeciwciałem GABA-B. Po inkubacji niezwiązany streptawidyna-HRP jest wymywana podczas etapu przemywania. Następnie dodaje się roztwór substratu i kolor rozwija się proporcjonalnie do ilości ludzkiego GABA-B. Reakcję kończy się przez dodanie kwasowego roztworu zatrzymującego i mierzy się absorbancję przy 450 nm.

Przeznaczenie

Ten zestaw warstwowy służy do dokładnego ilościowego wykrywania ludzkiego kwasu gamma-aminomasłowego B (znanego również jako GABA-B) w surowicy, osoczu, supernatantach z hodowli komórkowej, lizatach komórkowych, homogenatach tkankowych.

Nr kat. E 6830Hu

Standardowy zakres krzywej : 2 μg / dl - 600 μg / dl

Czułość : 1,05 μg / dl

Przechowywanie : Przechowuj odczynniki w temperaturze 2–8 ° C. W przypadku przechowywania przez ponad 6 miesięcy należy zapoznać się z datą ważności przechowywać w temperaturze -20 ° C. Unikaj powtarzających się cykli rozmrażania. W przypadku otwarcia poszczególnych odczynników zaleca się użycie zestawu w ciągu 1 miesiąca.

* Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do celów badawczych, a nie do użytku w procedurach diagnostycznych. Zdecydowanie zaleca się przeczytanie tej instrukcji całkowicie przed użyciem.

Środki ostrożności

• Przed użyciem zestaw testowy Elisa i próbkę należy naturalnie ogrzać do temperatury pokojowej przez 30 minut.
• W eksperymencie należy ściśle przestrzegać tej instrukcji.
• Po usunięciu żądanej liczby pasków natychmiast ponownie zamknij torebkę, aby zabezpieczyć resztki przed zniszczeniem. Zakryj wszystkie odczynniki, gdy nie są używane.
• Podczas pipetowania odczynników upewnij się, że kolejność pipetowania i szybkość dodawania od studni do studni.
• Końcówki do pipet i uszczelniacz do płyt w dłoni powinny być czyste i jednorazowe, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego.
• Unikaj jednoczesnego używania odczynników z różnych partii.
• Roztwór substratu B jest wrażliwy na światło, nie wystawiaj roztworu substratu B na działanie światła przez długi czas.
• Roztwór zatrzymujący zawiera kwas. Podczas korzystania z tego materiału należy nosić ochronę oczu, dłoni i skóry. Unikać kontaktu skóry lub błon śluzowych z odczynnikiem zestawu
• Zestawu testowego Elisa nie należy używać po upływie daty ważności.

Kolekcja próbek

Surowica Pozwól surowicy krzepnąć przez 10-20 minut w temperaturze pokojowej. Wirować przy 2000-3000 RPM przez 20 minut.

Osocze Zbierz osocze za pomocą EDTA lub heparyny jako antykoagulantu. Odwiruj próbki przez 15 minut przy 2000-3000 RPM w 2 - 8 ° C w ciągu 30 minut od pobrania.

Mocz zbierać za pomocą jałowej probówki. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut. Podczas zbierania płynu opłucnowego i dootrzewnowego należy postępować zgodnie z wyżej wymienionymi procedurami.

Komórka S nadernatant Zbieraj jałowymi probówkami podczas badania wydzielonych składników. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut. Zbierz ostrożnie supernatanty. Podczas badania składników w komórce, użyj PBS (pH 7,2-7,4), aby rozcieńczyć zawiesinę komórek do stężenia komórek około 1 miliona / ml. Uszkadzaj komórki przez powtarzające się cykle zamrażania i rozmrażania, aby wypuścić elementy wewnętrzne. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut.

Tkanki i inne płyny ustrojowe Przepłukać tkanki w PBS (pH 7,4), aby dokładnie usunąć nadmiar krwi i zważyć przed homogenizacją. Zmiel tkanki i zhomogenizuj je w PBS (pH 7,4) za pomocą szklanego homogenizatora na lodzie. Rozmrozić w 2-8 ° C lub zamrozić w -20 ° C. Wirować przy 2000-3000 obr / min przez około 20 minut.

Uwaga

• Stężenia w próbce należy przewidzieć przed użyciem w teście. Jeśli stężenie próbki nie mieści się w zakresie krzywej standardowej, użytkownicy muszą skontaktować się z nami, aby ustalić optymalną próbkę dla swoich konkretnych eksperymentów.
• Próbki do wykorzystania w ciągu 5 dni należy przechowywać w temperaturze 2–8 ° C. Próbki należy podzielić na próbki lub przechowywać w temperaturze -20 ° C w ciągu 1 miesiąca lub -80 ° C w ciągu 6 miesięcy. Unikaj powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania.
• Próbki należy doprowadzić do temperatury pokojowej przed rozpoczęciem testu.
• Odwiruj, aby pobrać próbkę przed użyciem.
• Próbki zawierające NaN3 nie mogą być badane, ponieważ hamują aktywność peroksydazy chrzanowej (HRP).
• Zbierz ostrożnie supernatanty. Gdy podczas przechowywania wystąpią osady, należy ponownie wykonać wirowanie.
• Hemoliza może znacznie wpłynąć na ważność wyników badań. Uważaj, aby zminimalizować hemolizę.

* Tego zestawu nie można rozcieńczyć . Ze względu na materiał, którego używamy do przygotowania zestawu, interferencja matrycy próbki może fałszywie obniżyć specyficzność i dokładność testu.

streszczenie

1. Przygotuj wszystkie odczynniki, próbki i standardy.

2. Dodaj próbkę i odczynnik ELISA do każdego dołka. Inkubować przez 1 godzinę w 37 ° C.

3. Umyj płytkę 5 razy.

4. Dodaj roztwór substratu A i B. Inkubuj przez 10 minut w 37 ° C.

5. Dodaj roztwór zatrzymujący i kolor się rozwija.

6. Odczytaj wartość OD w ciągu 10 minut.

Obliczanie wyniku

Skonstruuj krzywą standardową, wykreślając średnią gęstość optyczną dla każdego standardu na osi pionowej (Y) względem stężenia na osi poziomej (X) i narysuj krzywą najlepszego dopasowania przez punkty na wykresie. Obliczenia te można najlepiej wykonać za pomocą komputerowego oprogramowania do dopasowywania krzywych, a najlepszą linię dopasowania można określić na podstawie analizy regresji.