Indywidualny 1 Zestaw testowy HAT1 ELISA o rozmiarze 96 dołków Ludzka acetylotransferaza histonowa

High Sensitive Human Histone Acetyltransferase 1 Zestaw ELISA Indywidualny zestaw testowy HAT1 ELISA

Nr kat. E6942Hu

Standardowy zakres krzywej: 0,05 ng / ml - 30 ng / ml

Wrażliwość: 0,028ng / ml

Rozmiar: 96 dołków

Przechowywanie: Przechowywać odczynniki w temperaturze 2–8 ° C.W przypadku przechowywania przez ponad 6 miesięcy należy przestrzegać terminu ważności, przechowywać go w temperaturze -20 ° C.Unikaj powtarzających się cykli rozmrażania.W przypadku otwarcia poszczególnych odczynników zaleca się zużycie zestawu w ciągu 1 miesiąca.

* Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do celów badawczych, a nie do stosowania w procedurach diagnostycznych.Zdecydowanie zalecamy przeczytanie całej instrukcji przed użyciem.

Środki ostrożności

• Przed użyciem zestaw kanapkowy elisa i próbkę należy ogrzać w sposób naturalny do temperatury pokojowej przez 30 minut.
• W eksperymencie należy ściśle przestrzegać tej instrukcji.
• Po usunięciu żądanej liczby pasków należy natychmiast ponownie zamknąć worek, aby zabezpieczyć pozostałości przed zniszczeniem.Zakryj wszystkie odczynniki, gdy nie są używane.
• Podczas pipetowania odczynników sprawdź kolejność pipetowania i szybkość dodawania od dołków.
• Końcówki pipety i zgrzewarka do płytek w dłoni powinny być czyste i jednorazowe, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego.
• Unikaj jednoczesnego stosowania odczynników z różnych serii.
• Roztwór podłoża B jest wrażliwy na światło, nie wystawiaj roztworu podłoża B na działanie światła przez długi czas.
• Roztwór zatrzymujący zawiera kwas.Podczas używania tego materiału należy nosić ochronę oczu, rąk i skóry.Unikać kontaktu skóry lub błon śluzowych z odczynnikiem z zestawu.
• Zestaw kanapkowy elisa nie powinien być używany po upływie terminu ważności.

Dostarczony odczynnik

Kolekcja próbek

SerumPozwól surowicy krzepnąć przez 10-20 minut w temperaturze pokojowej.Wirować przy 2000-3000 RPM przez 20 minut.

OsoczePobrać osocze używając EDTA lub heparyny jako antykoagulanta.Wirować próbki przez 15 minut przy 2000-3000 RPM w 2 - 8 ° C w ciągu 30 minut od pobrania.

MoczZbierz sterylną probówką.Wirować przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut.Podczas pobierania płynu otrzewnowego i płynu mózgowo-rdzeniowego należy postępować zgodnie z wyżej wymienionymi procedurami.

Hodowle komórkoweupernatantPobierać do sterylnych probówek podczas badania wydzielin.Wirować przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut.Ostrożnie zbierz supernatanty.Podczas badania składników w komórce użyj PBS (pH 7,2-7,4), aby rozcieńczyć zawiesinę komórek do stężenia komórek około 1 milion / ml.Uszkadzaj komórki poprzez powtarzające się cykle zamrażania i rozmrażania, aby wypuścić wewnętrzne komponenty.Wirować przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut.

Tkanka i inne płyny ustrojowe Przepłucz tkanki w PBS (pH 7,4), aby dokładnie usunąć nadmiar krwi i zważ przed homogenizacją.Zmiel tkanki i zhomogenizuj je w PBS (pH 7,4) w szklanym homogenizatorze na lodzie.Rozmrozić w temperaturze 2-8 ° C lub zamrozić w temperaturze -20 ° C.Wirować przy 2000-3000 RPM przez około 20 minut.

* Próbki nie można rozcieńczać tym zestawem.Ze względu na materiał, którego używamy do przygotowania zestawu, ingerencja w matrycę próbki może fałszywie obniżać specyficzność i dokładność testu.

Przygotowanie odczynników

Wszystkie odczynniki przed użyciem należy ogrzać do temperatury pokojowej.

Standard Zrekonstytuować 120 μl standardu (32 ng / ml) za pomocą 120 μl standardowego rozcieńczalnika, aby uzyskać 16 ng / ml standardowego roztworu podstawowego.Przed wykonaniem rozcieńczeń odstawić standard na 15 minut z delikatnym mieszaniem.Przygotować podwójne punkty wzorcowe, seryjnie rozcieńczając standardowy roztwór podstawowy (16 ng / ml) 1: 2 standardowym rozcieńczalnikiem w celu uzyskania roztworów 8 ng / ml, 4 ng / ml, 2 ng / ml i 1 ng / ml.Rozcieńczalnik standardowy służy jako standard zerowy (0 ng / ml).Pozostały roztwór należy zamrozić w temperaturze -20 ° C i zużyć w ciągu miesiąca.Sugerowane rozcieńczenia roztworów wzorcowych są następujące:

Wash BufferRozcieńczyć 20 ml koncentratu buforu do przemywania 25x w wodzie dejonizowanej lub destylowanej, aby uzyskać 500 ml 1x buforu do przemywania.Jeśli w koncentracie utworzyły się kryształy, delikatnie wymieszaj, aż kryształy całkowicie się rozpuszczą.

Podsumowanie

1. Przygotuj wszystkie odczynniki, próbki i standardy.

2. Dodaj próbkę i odczynnik ELISA do każdego dołka.Inkubować przez 1 godzinę w 37 ° C.

3. Umyj płytkę 5 razy.

4. Dodać roztwory substratu A i B. Inkubować przez 10 minut w 37 ° C.

5. Dodać roztwór zatrzymujący i zabarwić.

6. Odczytaj wartość OD w ciągu 10 minut.